上海仁捷介紹ELISA試劑盒操作步驟

　　ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點，已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領(lǐng)域。ELISA試驗廣泛應用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中。進行ELISA試驗就須用到試劑盒，在實驗中操作過程是非常重要的，下面我們就來簡單介紹一下ELISA試劑盒操作步驟：

　　1、取出試劑盒室溫平衡30min，取出血樣放至室溫；

　　2、配標準品：取150uL標準品加入150uL標準品稀釋液稀釋，依次稀釋5次；

　　3、加樣：分別于各反應孔中加入標準品50uL，樣品40UL，標準品做復孔，樣品做3孔；

　　4、分別于樣品孔中加入10UL抗體；

　　5、標準品和樣品孔中分別加入50uL鏈酶親和素-HRP，蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻，37℃溫育60min；

　　6、配洗滌液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用；

　　7、洗滌：小心揭開封板膜，棄去液體，甩干，每孔加200uL洗滌液，靜置30s后棄去，如此重復5次，拍干；

　　8、顯色：每孔先加入顯色劑A 50uL，再加顯色劑B 50uL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色6min；

　　9、終止：每孔加入終止液50uL，終止反應（此時藍色立即轉(zhuǎn)為黃色）；

　　10、測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度。測定應在加終止液10min之內(nèi)進行；

　　11、保存結(jié)果，收拾桌面；

　　12、分析處理數(shù)據(jù)。

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